Proclin 系列防腐剂

Proclin 系列防腐剂
为解决生物样本处理过程中保存期短的问题，SUPELCO 公司推出新一代生物防腐剂 ProClin150，200，300，5000，可以有效地控制体外诊断试剂中微生物的生长。当浓度达到 0.02% 条件下，ProClin 系列防腐剂具有广谱活性，能在比较长的时间内抑制、和酵母菌 等微生物的生长；同时，它又能保持体系中酶的活性，因此它是一种理想的可替代硫汞撒、叠氮 化钠和庆大霉素等生物防腐剂。
一、ProClin 系列防腐剂的优点
• 广谱性，作用速度快；良好的与酶的相容性，不会影响与酶或抗体的     相关反应。
• 使用剂量少，6-20ppm 的 ProClin300 即可达到抑菌的目的。
• pH 适用范围广（pH2-8.5* ）,化学稳定性好。经实验室检测，在 25 度下保存 2 年，该防 腐剂的活性组分仅损失 3%。
• 毒性远低于同类产品硫柳汞。
• 与水可以任意比混合。
二、ProClin 系列防腐剂作用原理
ProClin 系列防腐剂的活性成分主要是 2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮（MCI）和 5-氯-2-甲基-4- 异噻唑啉-3-酮（CMCI）。这两种成分抑制细胞的生长以及促使细胞凋亡的原理相同。活性成分 在与细胞膜接触几分钟后，立即可以渗透到膜内并抑制细胞内酶的活性（见图 1）。目标酶处于 细胞代谢 KREBS 循环的中心位置，ProClin 系列防腐剂作用 KREBS 循环的四个不同位置(见图 2)： 丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase)，a -酮戊二酸脱氢酶(ketoglutarate dehydrogenase)， 脱氢酶(succinate dehydrogenase)和 NADH 脱氢酶(NADH dehydrogenase)。从而抑制细胞 生长代谢，大分子的合成，引起细胞内能量水平迅速下降。由于能量体系的崩溃，细胞不能合成 日常代谢所需要的化合物。所有的及至少拥有部分 KREBS 循环，所以 ProClin 系列防腐 剂的适用的范围非常广泛。其次，ProClin 系列防腐剂具有多标靶作用位点，因此大大降低了因 变异产生的微生物的耐药性。随着 KREBS 循环被阻断，细胞产生能量（以合成 ATP 为标志，见图 3）和合成酶等生物活性物质的能力迅速下降，但其使用剂量却保持比较低的水平对人畜无害。
三、ProClin 系列防腐剂性能
    1. ProClin 系列防腐剂对诊断试剂影响：
      实验数据表明，ProClin 系列防腐剂不会对诊断试剂中的关键酶与底物的结合速率产生 影响，比如：辣根过氧化酶（HRP），碱性磷酸酶（AP）。 图 4. 250ppmProClin300 对 HRP(AP)与底物结合速率的影响 短期效应 即使 ProClin300 的使用浓度超过推荐浓度 15 倍时，其短期内对于 HRP 和 AP 的 Km 和 Vmax 无影响（见表 1）。 表 ***Clin300 对 HRP 和 AP 的 Vmax 的影响
               
                  Km（Mm）       Vmax（ΔA/min/mg prrotein）
辣根过氧化酶(HRP)       6.9                 904
+15ppm ProClin300       6.8                 861
辣根过氧化酶(HRP)       7.9                 520                                 +250ppm ProClin300       8.3                 525
  碱性磷酸酶(AP)         0.69                 138
+15ppm ProClin300       0.56                 131
碱性磷酸酶(AP)       1.40                 153
+250ppm ProClin300       1.20                 142

长期效应
长期使用 ProClin 300 同样不会对酶（例如：HRP 和 AP，见图 5）的活性产生影响。 图 5. 4 度(37 度)下 ProClin 对 AP (HRP)活性的影响

2. ProClin 系列防腐剂对抗体结合的影响
    在推荐使用浓度下，ProClin 系列防腐剂不会对抗体的结合产生影响。通过研究 ProClin 300 对经纯化过小鼠 IgM 抗原与联结 HRP 的抗-小鼠 IgM 抗体之间结合的影响，表明浓度在 300ppm 以下，ProClin 300 不会对其产生影响（见图 6）。50ppm 的 ProClin 300 保存上述抗体 35 天同 样无影响。 图 6. ProClin300 对连接 HRP 的抗体影响
四、ProClin 系列防腐剂的参数
    应用 体外诊断试剂盒，校正液，对照液，有机试剂的保存 仅 ProClin5000 推荐使用在血清基质液的保存
    1 2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮和 5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮
    2 2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮
    3 数据在收集中
相关试剂
    HRP 酶稳定剂 ZB055 3500.00/100 克
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